产品货号：
SNM091
中文名称：
内源性一氧化碳测定试剂盒(测组织)(比色法)
英文名称：
Endogenous carbon monoxide assay kit
产品规格：
50管/48样
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒可测各种动物组织等样本中内源性一氧化碳含量。
一氧化碳（carbon monoxide，CO）是与一氧化氮（NO）极相似的小分子气态物质。90年代以来的大量研究揭示，生物体内源性CO不仅作为一种新型的神经递质参与中枢神经系统的信息传递，还具有舒张血管、抑制血管平滑肌和血管内膜增殖、抑制血小板聚集、调节体内激素分泌、抑制细胞凋亡等多种生物学功能，在机体多种生理及病理状态中发挥重要的作用。
根据碳氧血红蛋白（HbCO）和还原血红蛋白（Hb）吸收光谱的差异，选择HbCO吸光度之差最大而Hb吸光度之差为零的两个波长，应用双波长分光光度法测定样本在这两个波长下的吸光度差值（△OD），再通过标准曲线求出HbCO百分浓度，代入公式计算出内源性一氧化碳（CO）含量。
保存：2～8℃，有效期3个月。
样本前处理：
准确称取组织重量，按重量（g）:体积（mL）=1:9的比例，加入生理盐水或试剂一溶血剂，如果你只测HbCO一个指标则可以用试剂一溶血剂制备成10%的组织匀浆液，如果你同时要测其它的指标则可用生理盐水制备成10%的组织匀浆液，2500转/分，离心10分钟，取上清液，待测。
碳氧血红蛋白（HbCO）百分浓度曲线：
可自行制作HbCO百分浓度曲线，也可参照我司提供的HbCO百分浓度曲线
相关搜索：内源性一氧化碳测定试剂盒(测组织)(比色法)，内源性一氧化碳，CO，Endogenous carbon monoxide assay kit
一氧化碳（carbon monoxide，CO）是与一氧化氮（NO）极相似的小分子气态物质。90年代以来的大量研究揭示，生物体内源性CO不仅作为一种新型的神经递质参与中枢神经系统的信息传递，还具有舒张血管、抑制血管平滑肌和血管内膜增殖、抑制血小板聚集、调节体内激素分泌、抑制细胞凋亡等多种生物学功能，在机体多种生理及病理状态中发挥重要的作用。
根据碳氧血红蛋白（HbCO）和还原血红蛋白（Hb）吸收光谱的差异，选择HbCO吸光度之差最大而Hb吸光度之差为零的两个波长，应用双波长分光光度法测定样本在这两个波长下的吸光度差值（△OD），再通过标准曲线求出HbCO百分浓度，代入公式计算出内源性一氧化碳（CO）含量。
- 快速简便：全程约2小时，可测50例左右样本。
- 再现性好：变异系数CV=1.7%。
- 回收试验：X =99%。
- 受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
- 测试面广：可测动物血清（浆）、组织等。
| 组分 | 规格 | 说明 | 保存 |
| 试剂一：溶血剂 | 100mL | 4℃ | |
| 试剂二：缓冲液 | 100mL×2 | 4℃ | |
| 试剂三：粉剂 | 6瓶 | 碳氧血红蛋白测定 | 4℃避光密封 |
| 试剂四：还原粉剂 | 6支 | 制作HbCO百分曲线用 | 4℃避光密封 |
| 试剂五：血红蛋白Hb测定浓缩液 | 1mL×2 | 4℃避光密封 | |
| 试剂六：粉剂 | 1瓶 | 用时加蒸馏水至100mL | 4℃ |
| 试剂七：粉剂 | 1瓶 | 用时加蒸馏水至200mL | 4℃ |
| 试剂八：蛋白标准液 | 56.3g/L | ≤-20℃ |
保存：2～8℃，有效期3个月。
- 紫外分光光度计（比色测定波长为370nm）
- 恒温水浴箱或气浴箱（孵育温度为37℃）
- 高速冷冻台式离心机
- 漩涡混匀器
- 微量移液器
- 碳氧血红蛋白测定工作液：临用前，往每瓶测定粉剂中加入23mL试剂二缓冲液，加盖颠倒混合，使完全溶解，现用现配，用多少配多少，2小时内用完，用黑袋注意避光。
- 血红蛋白Hb测定应用液：临用前将浓缩液用蒸馏水1∶99稀释，即100倍稀释，现用现配。配好的试剂2～8℃避光保存，可存放1个月以上。
- 双缩脲试剂：试剂六与试剂七完全溶解后才能充分混合配成双缩脲试剂。（切记不能将试剂六、试剂七粉剂混合后再加水溶解。）
样本前处理：
准确称取组织重量，按重量（g）:体积（mL）=1:9的比例，加入生理盐水或试剂一溶血剂，如果你只测HbCO一个指标则可以用试剂一溶血剂制备成10%的组织匀浆液，如果你同时要测其它的指标则可用生理盐水制备成10%的组织匀浆液，2500转/分，离心10分钟，取上清液，待测。
- 血红蛋白Hb测定及计算：
取0.01mL样本（全血）与2.5mL的100倍稀释的试剂五应用液（血红蛋白测定应用液），混匀，静置5分钟后，1cm光径蒸馏水调零，540nm测定各管吸光度值。
血红蛋白含量的计算：
血红蛋白含量(g/L) ＝ A540×367.7 - 碳氧血红蛋白测定
- 取经过前处理的样本（经过前处理的组织匀浆上清液）0.2mL，加入试剂三碳氧血红蛋白Hb测定工作液2.3mL，混匀。
- 静置10分钟后，试剂二缓冲液调零，1cm光径，分别测568nm与581nm的吸光度。
- 取经过前处理的样本（经过前处理的组织匀浆上清液）0.2mL，加入试剂三碳氧血红蛋白Hb测定工作液2.3mL，混匀。
- 组织蛋白的测定：
混匀，37℃水浴10分钟，流水冷却后，波长540nm，光径1cm，蒸馏水调零，测各管OD值。加入物 空白管 标准管 测定管 蒸馏水(mL) 0.05 标准液(mL) 0.05 组织匀浆样品(mL) 0.05 双缩脲试剂(mL) 2.5 2.5 2.5 待测样本蛋白浓度
(mgprot/mL)＝ 测定OD值－空白OD值 × 蛋白标准品浓度
(56.3mg/mL)标准OD值－空白OD值
碳氧血红蛋白（HbCO）百分浓度曲线：
可自行制作HbCO百分浓度曲线，也可参照我司提供的HbCO百分浓度曲线
- 饱和碳氧血红蛋白与饱和还原血红蛋白的制备
- 取不吸烟健康人肝素抗凝全血10μL，加入试剂一溶血液1.2mL混匀，静置5分钟使溶血完全。
- 从中取2份，每份0.2mL，加入到两支具塞试管中，再分别加入2.3mL试剂二缓冲液，混匀。
- 在通风橱内，向其中一支试管里通纯一氧化碳（CO），连续通15分钟，再通入氮气20分钟，得到饱和HbCO溶液。
- 再向另一支试管通氧气（O2），连续通20分钟，得到饱和HbO2溶液。
- 取不吸烟健康人肝素抗凝全血10μL，加入试剂一溶血液1.2mL混匀，静置5分钟使溶血完全。
- 碳氧血红蛋白百分浓度曲线的制备
管号 1 2 3 4 5 6 饱和HbCO液（mL） 0 0.25 0.50 1.00 2.00 2.50 饱和HbO2液（mL） 2.50 2.25 2.00 1.50 0.50 0 试剂四：还原粉剂 1支 1支 1支 1支 1支 1支 混匀，静置10分钟，试剂二调零，1cm光径，分别测568nm与581nm的吸光度 HbCO百分浓度 0% 10% 20% 40% 80% 100% △OD（A568-A581） 0 0.122 0.251 0.481 0.984 1.213 碳氧血红蛋白(HbCO%)百分浓度曲线
Rank 1 Eqn 8160 Line(a,b) Robust None
r2=0.99982996 DFAdj r2=0.99971661 FitStdErr=0.0058618743 Fstat=23520.342
a=-0.0010894793
b=0.82154601碳氧血红蛋白百分浓度 
碳氧血红蛋白百分浓度 绝对吸光度OD值
- 碳氧血红蛋白百分浓度（HbCO%）的计算：
通过分别测定568nm与581nm的吸光度，计算△OD（A568-A581）的绝对吸光度值差。再由标准曲线，通过回归方程计算出碳氧血红蛋白百分比浓度，即HbCO%。
【注1】如不直接制作百分浓度曲线，也可参照本所提供的百分浓度曲线，回归方程为：
y = 0.822x + 0.001
x即为△OD（A568-A581）的绝对吸光度值，y即为碳氧血红蛋白百分比浓度。
HbCO%=[0.822×△OD（A568-A581）+0.001]×100%
【注2】 A568为HbCO吸光度之差最大的波长；A581为Hb吸光度之差为零的两个波长 - 溶血液中Hb的测定步骤及计算公式：
取0.01mL样本（经过前处理的组织匀浆上清液）与2.5mL的100倍稀释的试剂五应用液（血红蛋白测定应用液），混匀，静置5分钟后，1cm光径蒸馏水调零，波长540nm测定吸光度值。
血红蛋白含量的计算：
血红蛋白含量(g/L)＝A540×367.7 - 组织中蛋白浓度的计算公式
待测样本蛋白浓度
(mgprot/mL)＝ 测定OD值－空白OD值 × 蛋白标准品浓度
(56.3mg/mL)标准OD值－空白OD值
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